科研药盒,慎用于临床 ATP含量试剂盒操作说明书 ATP (HY-M0032)KIT ATP(adenosine-5’triphosphate,ATP)中文名称为腺嘌呤核苷三磷酸,又叫三磷酸腺苷,简称为ATP,是生物体内能量转换最基本的载体,其含量变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP是体内组织细胞一切生命活动所需能量的直接来源,储存和传递化学能,蛋白质、脂肪、糖和核苷酸的合成都需它参与,可促使机体各种细胞的修复和再生,增强细胞代谢活性。ATP水平的改变,会影响许多细胞功能。通常细胞再凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。 检测原理: 肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,用磷钼酸比色法进行检测。 试剂组成: 试剂1:肌酸溶液 1瓶 试剂2:酶溶液 1瓶 试剂3:显色剂 2瓶 (A、B液,检测时1:5配制) 试剂4:标准品 1瓶 样本前处理: 1、红细胞:抗凝全血取下层压积红细胞,按1:2或1:4的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血完全,制备成溶血液。将制好的溶血液加入玻璃管中沸水加热煮10分钟,冷却后,3500转离心10分钟,取上清液待测。 2、组织样本:组织称重后,剪碎,按重量体积比1:9加入沸双蒸水,在沸水中匀浆,制成10%匀浆液,再置于沸水中水浴10分钟,取出混匀抽提1分钟,3500转/离心10分钟,取上清液待测。 操作步骤 ATP操作步骤 单位(ul) ————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本 ————————————————————————————————— 样本 —— —— 100 水 100 —— —— 标准品 —— 100 —— 试剂1 200 200 200 试剂2: 100 100 100 37度 水浴30分钟 ————————————————————————————————— 试剂3: 200 200 200 ————————————————————————————————— 混匀,37度 20分钟 波长700nm 终点法 计算结果 以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计) 全自动或半自动生化仪直接读取数据 正常考值: 各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考: 人红细胞4330±276nmol/g HB 注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 本试剂盒主要技术指标: 线性范围:0-10000nmol/L 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。 灵敏度:<20nmol/L 生产日期:2017-09-25 有效日期:2018-01-25 生产批号:20170925 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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