科研药盒，慎用于临床
辅酶II NADP/NADPH试剂盒操作说明书
NADP/NADPH(HY-N0107)KIT
辅酶II( NADP) , 又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,有氧化型(NADP+ )和还原型( NADPH) 两种形式,是体内许多还原酶的重要辅助因子,在体内许多代谢反应中发挥递氢作用, 还可以维持谷胱甘肽于还原状态, 从而保护一些含-SH 蛋白质及酶免受氧化剂损伤。NADP和NADPH分别是磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应中主要的氢受体和供体。NADP(H)含量和NADPH/NADP比值与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP比值是细胞氧化还原态的主要标志，而且对生物合成和抗氧化代谢中起调控作用。
测定原理：分别用酸性或碱性提取液提取样品中的NADPH和NADP+。NADPH 在N-甲基吩嗪甲基硫酸盐( PMS)的中介下, 使噻唑蓝( MTT ) 还原为甲瓒(Formazan) , 570nm下检测吸光度，NADPH浓度越大颜色越深。同时生成的NADP+ 再次经6-磷酸葡萄糖( G6P) 和6-磷酸葡萄糖脱氢酶( G6PD) 作用生成NADPH,再使噻唑蓝还原为甲瓒,生成率与NADP+含量成比例，颜色越深NADP+浓度越大。
试剂组成
试剂1：碱性提取液 1瓶
试剂2：酸性提取液 1瓶
试剂3: 基质缓冲液 （内含MTT,PMS）1瓶
试剂4：基质液（内含G6PD） 1瓶
试剂5：标准品
操作步骤： NADP检测操作步骤
（单位ul）
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标准管 对照管 标本管
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标准 100 —— ——
水 —— 100 ——
标本 —— —— 100
试剂2 200 200 200
试剂3 500 500 500
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混匀 37度温育 5分钟
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试剂5 100 100 100
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混匀 570nm波长下读取吸光度
NADPH检测操作步骤
（单位ul）
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标准管 对照管 标本管
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标准 100 —— ——
水 —— 100 ——
标本 —— —— 100
试剂1 200 200 200
试剂3 500 500 500
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混匀 37度温育 5分钟
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试剂5 100 100 100
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混匀 570nm波长下读取吸光度
计算结果
适用于分光光度计：将标准品用缓冲液（R1）进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标，以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图，待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。
全自动或半自动生化仪直接读取数据。
各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
NADPH 2.81±1.06 mg/L
NADP+ 0.75±0.34mg/L
注意事项：
1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准，准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氮钠，应避免直接接触皮 肤和眼睛，切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标：
线性范围：0-3mg/L
精密度：批内变异系数：CVw<7.3%；
批间变异系数：CVw < 10%
灵敏度：<0.1 mg/L
有效期： 6个月
生产批号：20170624
地址：北京市海淀区阜成路42号 中裕商务花园2号楼202室
北京华英生物技术研究所
邮编：100036
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