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          抑制与产生超氧阴离子自由基试剂盒操作说明书

O2- (HY-M0067)KIT

    生物再生理代谢过程中会产生多种活性氧,例如H2O2、OH-和O2-,它们在机体内达到一定的浓度时,会对身体造成损害,这些活性氧时诱发和促进人体衰老的原因之一,其中O2-的作用很重要,它会诱发其他自由基的生成。因此一旦消除了O2-,则可以防止活性氧对机体组织的损伤,延缓衰老的进程。

 

检测原理:模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统,产生超氧阴离子自由基O2- ,加入电子传递物质及显色剂,使反应体系呈现紫红色,可用分光光度计测其吸光度。当抗超氧阴离子的物质,例如:血清、组织等可抑制该反应使超氧阴离子自由基O2-减少,故比色时颜色变浅,而产生超氧阴离子的物质,例如:白细胞,有些抗肿瘤的药物,可增加此反应,使超氧阴离子自由基O2-增加,故比色时颜色变深。依据形成物的颜色深浅计算出抑制或产生超氧阴离子自由基O2-胡能力强弱。

试剂盒组成:

试剂1R1:缓冲液  1瓶

试剂2R2:反应液  1瓶

试剂3R3:显色剂  1瓶

试剂4R4):标准品  1  

 

操作步骤

                        

 O2-操作步骤                        单位(ul)

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                   对照管           标准管           样本

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试剂1              200               200             200

样本                ——            ——             50

R4标准品           ——              50             ——

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混匀      25   孵育60分钟

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试剂2              100               100             100

试剂3              100               100             100

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室温     20min    530nm  波长下测OD

 计算结果

适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。

全自动或半自动生化仪直接读取数据。

正常参考值:

各实验室应建立自己的正常值,正常参考值仅供参考:50-250 U/ml

注意事项:

1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。

2. 本法以定值血清为标准,准确性高。

3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮   肤和眼睛,切勿吞咽。

4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

本试剂盒主要技术指标

线性范围:0-300U/ml

精密度:批内变异系数:CVw<7.3%

          批间变异系数:CVw < 10%

灵敏度:<0.1U/ml

有效期:6个月

批号: 20180122

 

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