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                                              科研药盒,慎用于临床                  

        脂蛋白脂酶试剂盒说明书

                  LPL (HY-M0020)KIT

脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipaseLPL)存在于肝外毛细血管内皮细胞表面,是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种糖蛋白,分子量为60ku,它主要催化血浆中乳糜微粒和极低密度脂蛋白中甘油三酯的水解。肝脂酶(hepaticlipasehepatiltriglyceridasehepaticendothelaillipaseHLHTGL)属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一,与LPL在功能上有相似之处,然而却是两种不同性质的酶。HL是共有2N连接多聚糖链的糖蛋白,含有499个氨基酸残基,分子量53ku,基因位于第15号染色体上,能水解各种脂蛋白中的甘油三酯和磷脂,血浆中HL活性增高,可使小而致密的LDL等致动脉粥样硬化的脂蛋白水平增高,加速动脉粥样硬化的发生发展。

检测原理:以脂肪乳剂为底物,在37℃,PH=8.3的条件下与标本保温30分钟,标本中的LPL及HL可将底物中的甘油三酯(TG)水解为甘油和游离脂肪酸(FFA),用铜试剂法测定生成的FFA的量,即可分别计算出LPL和HL的活性。

试剂盒组成

试剂1:底物    1瓶            试剂2:SDS溶液  1瓶

试剂3:提取液    1瓶          试剂4:铜试剂  1瓶

试剂5:显色剂   1瓶

试剂6:标准品  1瓶

操作步骤

     脂蛋白酯酶操作步骤    (ul)

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                空白管         标准管           脂蛋白酯酶     

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标准品          ——            50               ——         

样本            ——           ——               50           

试剂1           ——           ——               100          

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                       室温 充分混匀

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试剂2            ——           ——             100          

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  室温 充分混匀 37度水浴30分钟

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试剂3          600              600              600            

                          振荡离心  取下层提取液   200微升

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试剂4           600             600             600             

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振荡离心  取下层提取液   200微升

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试剂5:         200              200             200           

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混匀,放置15分钟,波长 550nm  以蒸馏水调零, 用标准品定标为  用酶标仪读取OD    

计算结果

以各标准管倍比稀释后的浓度为横坐标,以对应的各管OD值为纵坐标作图,用待测管的OD值查出对应的浓度值。(适用于分光光度计)全自动或半自动生化仪直接读取数据。

正常参考值:

各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:

1U酶活力单位定义为,37度,1小时生成1umolFFA的量

酯酶活性=LPL活性+HL活性

HL活性:1.6U/ml  (umolFFA/ml.h)

LPL活性:2.6U/ml(umolFFA/ml.h)

注意事项:

1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。

2. 本法以定值血清为标准,准确性高。

3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮   肤和眼睛,切勿吞咽。

4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

本试剂盒主要技术指标:

线性范围:0-12U/ml

精密度:批内变异系数:CVw<7.3%

  批间变异系数:CVw < 10%

灵敏度:<0.1 U/ml

有效日期:6个月

生产批号:20190112

 

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