科研药盒,慎用于临床
脂蛋白脂酶试剂盒说明书
LPL (HY-M0020)KIT
脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase,LPL)存在于肝外毛细血管内皮细胞表面,是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种糖蛋白,分子量为60ku,它主要催化血浆中乳糜微粒和极低密度脂蛋白中甘油三酯的水解。肝脂酶(hepaticlipase或hepatiltriglyceridase或hepaticendothelaillipase,HL或HTGL)属于与血液循环中内源性TG代谢有关的酶之一,与LPL在功能上有相似之处,然而却是两种不同性质的酶。HL是共有2个N连接多聚糖链的糖蛋白,含有499个氨基酸残基,分子量53ku,基因位于第15号染色体上,能水解各种脂蛋白中的甘油三酯和磷脂,血浆中HL活性增高,可使小而致密的LDL等致动脉粥样硬化的脂蛋白水平增高,加速动脉粥样硬化的发生发展。
检测原理:以脂肪乳剂为底物,在37℃,PH=8.3的条件下与标本保温30分钟,标本中的LPL及HL可将底物中的甘油三酯(TG)水解为甘油和游离脂肪酸(FFA),用铜试剂法测定生成的FFA的量,即可分别计算出LPL和HL的活性。
试剂盒组成:
试剂1:底物 1瓶 试剂2:SDS溶液 1瓶
试剂3:提取液 1瓶 试剂4:铜试剂 1瓶
试剂5:显色剂 1瓶
试剂6:标准品 1瓶
操作步骤
脂蛋白酯酶操作步骤 (ul)
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空白管 标准管 脂蛋白酯酶
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标准品 —— 50 ——
样本 —— —— 50
试剂1 —— —— 100
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室温 , 充分混匀
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试剂2 —— —— 100
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室温 , 充分混匀 37度水浴30分钟
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试剂3 600 600 600
振荡离心 取下层提取液 200微升
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试剂4 600 600 600
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振荡离心 取下层提取液 200微升
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试剂5: 200 200 200
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混匀,放置15分钟,波长 550nm 以蒸馏水调零, 用标准品定标为 用酶标仪读取OD值
计算结果
以各标准管倍比稀释后的浓度为横坐标,以对应的各管OD值为纵坐标作图,用待测管的OD值查出对应的浓度值。(适用于分光光度计)全自动或半自动生化仪直接读取数据。
正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:
1U酶活力单位定义为,37度,1小时生成1umolFFA的量
酯酶活性=LPL活性+HL活性
HL活性:1.6U/ml (umolFFA/ml.h)
LPL活性:2.6U/ml(umolFFA/ml.h)
注意事项:
1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准,准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标:
线性范围:0-12U/ml
精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10% 。
灵敏度:<0.1 U/ml
有效日期:6个月
生产批号:20190112
地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A
北京华英生物技术研究所
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