2-硫代巴比妥酸值的测定 （直接法）
1 2-硫代巴比妥酸值 2-thiobarbituric acid value
1mg样品与1mL2-硫代巴比妥酸试剂反应，在530nm波长下测得的吸光度。
2-硫代巴比妥酸值没有单位，而是以1mg试样溶于100mL溶剂和试剂反应所测得的吸光度值为1个计量单位。
2 原理
标本的氧化产物与2 -硫代巴比妥酸反应形成缩合物，在530nm波长处具有最大吸收峰，测定其吸光度。
3 试剂
3.1 1-丁醇：水分含量不大于0.2%。
3.2 2-硫代巴比妥酸。
3.3 TBA试剂：称200mg 2-硫代巴比妥酸置于100mL容量瓶中，并用1-丁醇稀释至刻度。在室温下放置12h～15h，以溶解2-硫代巴比妥酸。然后用滤纸过滤，除去不溶性残渣。滤液用1-丁醇定容到100mL，并在0℃～4℃冰箱中储藏备用。TBA试剂保存和使用时间不超过1周。
3.4 所有试剂均为分析纯，实验用水应符合 GB/T 6682—2008 中三级水的要求。
4 操作步骤
4.1 称取液体或已制备好的试样50mg～200mg，精确到0.1mg，直接装入25mL容量瓶中。用5mL～10mL的1-丁醇溶解并稀释至刻度。
注：如果试样的吸光度不在0.2～0.8范围内，可重新调整称取试样的量。
4.2 用移液管（6.2）吸取5mL样品液（9.1）加入具塞试管（6.3）中，用另1支移液管（6.2）吸取5mLTBA试剂（5.3）加入该具塞试管中，盖上塞子并充分摇动。
将具塞试管置于95℃水浴锅（6.4）中加热2h。然后将具塞试管从水浴锅中取出并用自来水冷却至室温（大约10min）。
4.3 将具塞试管中的溶液转移到干净、干燥的10mm比色皿中，用蒸馏水在530nm处校正分光光度计（6.5）零点，测定溶液的吸光度（A）。
4.4 用移液管（6.2）吸取5mL1-丁醇（5.1）于具塞试管中，用另1支移液管（6.2）吸取5mLTBA试剂（5.3）加入具塞试管中，盖上塞子并充分摇动。将试管置于95℃水浴锅（6.4）中加热2h。将试管从水浴里取出并用自来水冷却至室温，大约10min。立即按9.3测定空白试剂吸光度（B）。
注： 空白试剂吸光度应不超过0.1。否则应制备新的符合纯度要求的TBA试剂。由于1-丁醇不纯可导致空白试剂吸光度超过0.1。将0.1%TBA溶剂蒸馏2h可除去其中所含杂质。1-丁醇中的水分可以通过蒸馏去除，弃掉初始溶液，收集乳白色溶液。
5 结果表示
5.1 2-硫代巴比妥酸值（TBA）按式（1）计算：
式中：
A——被测溶液的吸光度（9.3）；
B——空白试剂的吸光度（9.4）；
m——样品的质量，单位为毫克（mg）；
50 ——试样用1-丁醇稀释至25mL，并用10mm比色皿测定吸光度的有效因子。
计算结果保留3位小数。
5.2 当空白试剂吸光度低于0.05时，被测溶液的吸光度可通过蒸馏水校正后直接测得。
此时，按式（2）计算2-硫代巴比妥酸值（TBA）：
式中：
A——被测溶液的吸光度（9.3）；
m——样品的质量，单位为毫克（mg）；
50 ——试样用1-丁醇稀释至25mL，并用10mm比色皿测定吸光度的有效因子。
计算结果保留3位小数。
6 精密度
6.1 实验室间的检验
附录A汇总了本方法精密度的实验室间测试情况。由这些实验室间试验得到的数据可能不适用于其它范围和测试对象。
6.2 重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，在短时间内获得的两个独立测试结果的变异系数大于表A.1中所给的重复性限值（r）的情况应不超过5%。
6.3 再现性
在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，获得的两个独立测试结果的变异系数大于表A.1中所给的再现性限值（R）的情况应不超过5%。
生产日期：20200513
有效日期：6个月
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