科研药盒，慎用于临床 胰蛋白酶试剂盒说明书 Trypsin (HY-M0035) 胰蛋白酶（Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种，它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺少的工具。
检测原理： 在一定条件下，胰蛋白酶催化水解TAME的酯键，释放出的游离羧基与反应体系中的氢氧化钠发生中和反应，导致溶液PH值降低，以苯酚红为指示剂，在555nm处检测溶液的OD值。胰蛋白酶在一定浓度范围内与555nm处OD的降低呈线性关系。 试剂组成： 试剂1： 底物 1瓶 试剂2：反应液 1瓶 试剂3：反应液 1瓶 试剂4: 标准品 1瓶 操作步骤： 胰蛋白酶操作步骤 单位（ul） ———————————————————————————————————— 样本管 空白管 标准管 ————————————————————————————————— 试剂1 55 10 10 试剂2 70 70 70 试剂3 70 70 70 样本： 5 —— —— 标准品 —— —— 5 蒸馏水 —— 5 —— ————————————————————————————————— 充分混匀 555nm波长下读取1min时的吸光度A1和2min时的吸光度A2 计算⊿A=A1-A2 直接半自动或全自动生化仪上读取结果；或者将标准品用缓冲液进行倍比稀释后在分光光度计上读取OD值，将未知标本的OD值在曲线上查出对应的浓度值。 计算结果 使用96孔板测定计算公式如下： 1)按蛋白浓度计算 活性单位定义：室温下每克蛋白质每分钟催化555nm处吸光值减少0.5为1个酶活力单位 胰蛋白酶（U/mg prot）=⊿A×V反总÷(Cpr×V1)÷0.5÷T=80×⊿A÷Cpr 2)按样本质量计算 活性单位定义：室温下每克组织每分钟催化555nm处吸光值减少0.5为1个酶活力单位 胰蛋白酶（U/g 鲜重）=⊿A×V反总÷(W×V1÷V2)÷0.5÷T=80×⊿A÷W Cpr：匀浆液蛋白浓度(g/L) W：样本鲜重（g） V1：加入反应体系中匀浆液体积（ul） V2：匀浆液总体积（ul） V反：反应总体积（ul）T：反应时间（min） 正常参考值： 各实验室应建立自己的正常值 注意事项： 1. 样品测定值超过上限，用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准，准确性高。 3. 本产品应在2~8℃避光贮存，避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 4. 实验前最好用1～2个样本做预实验，保证吸光度变化在0.01～0.5之间为**** 5. 如所测结果⊿A小于0.005，可将反应时间延长到5min。如果⊿A大于0.5，可将样本稀释后测定。
有效日期：6个月 生产批号：20200511
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