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                        科研药盒,慎用于临床

            总巯基试剂盒操作说明书

         SH(HY-M0089)KIT

 

活性巯基(SH)主要存在于半胱氨酸,是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团。在蛋白质结构中2个巯基脱氢而形成的双硫键,使相邻多肽得以连接.对于维持蛋白质完整结构十分重要。所有动物组织都含有不同量的活性巯基,机体内起重要作用的谷胱甘肽,其生理作用主要是靠所含半胱氨酸中活性巯基起还原作用。巯基还是很多酶活性基团,一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合,影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动,药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。测定组织和血液中巯基含量已日益为人们所重视,以期探索对某些疾病的发生机理、治疗、预防以及预后判断等方面的研究意义。

检测原理

分光光度计法测总巯基含量巯基基团与5,5-二硫代--硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有****吸收峰。

 

试剂组成

试剂1:液体12ml   1支

试剂2:液体60ml   2瓶

试剂3:粉剂       2支,用时加蒸馏水50ml,4℃避光保存  

试剂4:粉剂       3支,用时加蒸馏水10ml,4℃避光冷藏可保存5天

 

操作步骤

                     -SH操作步骤                   单位(ml)

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                     对照管          空白管           样本

—————————————————————————————————

样本                 0.1              ——             0.1

试剂1                0.1              0.1               0.1

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摇动试管架几下,使试剂混匀

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试剂2              1.0              1,1              1.0

试剂3                0.5                               0.5

蒸馏水               0.5              ——             ——

                       混匀37  水浴15分钟

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试剂4              0.05            0.05              0.05

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                 混匀,室温静置 10分钟  波长412nm  0.5cm光径 测各管OD值 

 

 

 

 

计算结果

以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计)

全自动或半自动生化仪直接读取数据

正常考值:

各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:

最低检出限为10μmol/L

注意事项:

1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。

2. 本法以定值血清为标准,准确性高。

3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮   肤和眼睛,切勿吞咽。

4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。

 

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