科研药盒,慎用于临床 总巯基试剂盒操作说明书 SH(HY-M0089)KIT 活性巯基(SH)主要存在于半胱氨酸,是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团。在蛋白质结构中2个巯基脱氢而形成的双硫键,使相邻多肽得以连接.对于维持蛋白质完整结构十分重要。所有动物组织都含有不同量的活性巯基,机体内起重要作用的谷胱甘肽,其生理作用主要是靠所含半胱氨酸中活性巯基起还原作用。巯基还是很多酶活性基团,一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合,影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动,药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。测定组织和血液中巯基含量已日益为人们所重视,以期探索对某些疾病的发生机理、治疗、预防以及预后判断等方面的研究意义。 检测原理: 分光光度计法测总巯基含量巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有****吸收峰。 试剂组成: 试剂1:液体12ml 1支 试剂2:液体60ml 2瓶 试剂3:粉剂 2支,用时加蒸馏水50ml,4℃避光保存 试剂4:粉剂 3支,用时加蒸馏水10ml,4℃避光冷藏可保存5天 操作步骤 -SH操作步骤 单位(ml) ————————————————————————————————— 对照管 空白管 样本 ————————————————————————————————— 样本 0.1 —— 0.1 试剂1 0.1 0.1 0.1 ————————————————————————————————— 摇动试管架几下,使试剂混匀 ————————————————————————————————— 试剂2: 1.0 1,1 1.0 试剂3 0.5 0.5 蒸馏水 0.5 —— —— 混匀37度 水浴15分钟 ————————————————————————————————— 试剂4: 0.05 0.05 0.05 ————————————————————————————————— 混匀,室温静置 10分钟 波长412nm 0.5cm光径 测各管OD值 计算结果 以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计) 全自动或半自动生化仪直接读取数据 正常考值: 各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考: 最低检出限为10μmol/L 注意事项: 1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。 2. 本法以定值血清为标准,准确性高。 3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。 4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。 地址:北京市海淀区上地信息路2号上地七街国际创业园东区1号楼12层12A 北京华英生物技术研究所 邮编:100085 电话:010-88114651 传真:010-88112680 免费电话:8008109828
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