白细胞介素2酶联免疫试剂盒使用说明书
IL-2 (HY-H0003) ELISA KIT
使用前仔细阅读本说明书。本试剂盒采用酶联免疫竞争法,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
白细胞介素-2 (Interleukin-2 IL-2)主要由活化的T淋巴细胞产生,天然的IL-2含有糖基,基因重组IL-2不含糖基,由133个氨基酸组成,分子量度15KD。其主要生物活性是促进T淋巴细胞和NK细胞的增殖,促进B细胞分化增殖,促进抗体生成等。因此IL-2在机体免疫应答、免疫调节和抗肿瘤免疫中具有重要作用。IL-2产生或表达异常与临床疾病有密切关系,通过测定人外周血、尿液或人激活淋巴细胞培养上清液中的IL-2水平,可作为对肿瘤、心血管病、肝病、红斑狼疮、麻风病、艾滋病等疾病诊断、预后及观察的方法,并用于器官移植后有无排斥反应的早期诊断。IL-2含量测定是基础研究和临床上应用IL-2免疫治疗的重要辅助指标之一。
样品处理:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月
药盒组成:
1) 酶标试剂HRP 1 瓶
2) IL-2抗体1瓶
3) IL-2标准品6瓶:0、10、30、90、270、810pg/ml。
4) 封闭液 1瓶
5) 终止液 1瓶
6) 96微孔板1块
7) 显色液1瓶
8) 包被液1瓶
9) 洗涤液
10) 说明书
11) 封板膜
12) 密封袋
操作方法:
1) 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释):
2) 每孔加入抗体100ul包被2小时
3) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
4) 每孔加入封闭液200ul,轻轻晃动混匀,室温静置30分钟
5) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
6) 每孔加入包被液25微升,标本25微升,标准品50ul轻轻晃动混匀
7) 每孔加入HRP100ul轻轻晃动混匀,室温静置60分钟
8) 弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
9) 每孔加入显色液100ul,轻轻晃动混匀,显色15分钟
10) 每孔加入终止液100UL终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11) 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行
注意事项
1) 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2) 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
3) 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数
4) 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5) 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6) 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7) 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
1) 手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少300ul注入孔内,震荡30秒。根据需要,重复此过程数次。
2) 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
a) 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
b) 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实
本试剂盒主要技术参数:
标准范围:0-810pg/ml
灵敏度: <0.4pg/ml
精密度:批内CV<5%,批间CV<10%
规格: 96T/盒
保存: 2-8℃
有效期: 6个月(2-8℃)。
地址:北京市海淀区上地信息路2号国际创业园1号楼12层12A
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