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科研药盒,慎用于临床诊断

皮质醇酶联免疫试剂盒使用说明书

       Cor (HY-D0031) ELISA   KIT

使用前仔细阅读本说明书。本试剂盒采用酶联免疫竞争法,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。

皮质醇(Cortisol Cor)又称氢化可的松,是由肾上腺皮质分泌的一种糖皮质激素,对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的试验及其生理、病理和临床研究有重要意义。皮质醇对糖,脂肪和蛋白质的代谢有重要影响。人血液中皮质醇含量的测定是了解肾上腺皮质功能的一项重要参数,临床上主要用于鉴别诊断某些内分泌及代谢失常有关的一些疾病。

标本的收集:取晨空腹的静脉血,分离血清,放28可保存一周。如不立即测定,血清样品必须在-20保存,且不超过30天,应避免反复冻融。严重溶血的样品影响测定结果。

 

药盒组成

1)        酶标试剂HRP 1 瓶。

2)        Cor抗体1瓶。

3)        Cor标准品601050100200500ng/ml       

4)        终止液 1瓶。

5)        96微孔板1

6)        显色液1瓶。

7)        稀释液1

8)        洗涤液   

9)        说明书

10)     封板膜

11)     密封袋

 操作方法:

1)        标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释):

2)        每孔加入抗体100ul包被2小时

3)        弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。

4)        每孔加入封闭液200ul,轻轻晃动混匀,室温静置30分钟

5)        弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。

6)        每孔加入包被液25微升,标本25微升,标准品50ul轻轻晃动混匀

7)        每孔加入HRP100ul轻轻晃动混匀,室温静置60分钟

8)        弃去液体,甩干,每孔加稀释后洗涤液300ul,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。

9)        每孔加入显色液100ul,轻轻晃动混匀,显色15分钟

10)     每孔加入终止液100UL终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11)     测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行

注意事项

1.    2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.    各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3.    建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数

4.    严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

5.    为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6.    不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7.    底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少300ul注入孔内,震荡30秒。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

a)         不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

b)   标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验

技术指标:

      灵敏度:<1 ng/ml

  曲线范围:0-500 ng/ml

  批內变异系数<7.5%

       批间变异系数<9.5%

     

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