柠檬酸试剂盒说明书
CA (HY-NE305)KIT
柠檬酸(Citric Acid,CA)又称枸橼酸,是一种三羧酸类化合物,并因此而与其他羧酸有相似的物理和化学性质。柠檬酸在自然界中分布很广,柠檬酸存在于植物和动物的骨骼、肌肉、血液中。柠檬酸是将脂肪、蛋白质和糖转化为二氧化碳的过程中的重要化合物。这些化学反应是几乎所有代谢的核心反应,并且为高等生物提供能量。这一系列反应称作“柠檬酸循环”、“三羧酸循环”或“克氏循环”。
测定原理: 柠檬酸的结构特征是既属a 一羟基酸, 也属B-羟基酸, 故兼具二者的化学特性, 表现为在一定条件下既可脱羧又可脱水。在浓硫酸或高锰酸钾氧化时, 首先脱羧脱水生成丙酮二羧酸: 加溴即生成不溶于水而溶于醇、醚、三氯甲烷及其它有机溶剂的五溴丙酮,与硫化钠又可生成橙黄色复合物,生成物溶液色度深浅与生成量呈正相关, 而橙黄色复合物生成量又与生成五溴丙酮的被氧化的柠檬酸含量正相关。
试剂盒组成:
试剂1:处理液 1瓶 3ml
试剂2:反应液体 1瓶 5ml
试剂3:反应液体 1瓶 25ml
试剂4: 提取液 1瓶 25ml
试剂5:显色剂 1瓶 10ml
试剂6:标准品 1瓶 1ml
操作步骤
柠檬酸操作步骤 单位(ul)
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对照管 标准管 样本
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标准管 —— 50 ——
样本 —— —— 50
试剂1 50 50 50
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室温 混匀 30分钟
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试剂2 100 100 100
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室温 混匀 20分钟
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试剂3 500 500 500
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混匀 反应20分钟
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试剂4 500 500 500
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萃取底部
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试剂5 200 200 200
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室温反应15分钟 出现橙黄色复合物 波长420nm 酶标仪或分光光度计读取OD值
计算结果
适用于分光光度计:将标准品用缓冲液(R1)进行倍比稀释后的单位浓度为横坐标,以对应管的吸光度OD值为纵坐标作图,待测管OD值在曲线上查出对应的浓度值。
全自动或半自动生化仪直接读取数据) 如果定标扩大10倍,结果除以10
正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值
注意事项:
1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2. 本法以定值血清为标准,准确性高。
3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本试剂盒主要技术指标:
1、线性范围:0-160mg/L
2、精密度:批内变异系数:CVw<7.3%;
批间变异系数:CVw < 10%
3、灵敏度:<1mg/L
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